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CCK-8試劑盒的實驗要點有哪些
點擊次數(shù):110 更新時間:2025-10-14
  CCK-8試劑盒應用非常廣泛,如藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗以及生物因子的活性檢測等。本試劑盒檢測非常便捷。試劑盒僅一管已經(jīng)配制好的含有CCK-8溶液,無須再進行任何配制等操作。無須使用同位素,所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內完成。不必洗滌細胞,不必收集細胞,也不必采用額外的步驟去溶解??梢杂糜诖笈繕悠返臋z測。
  實驗要點:
  1.建議先做幾個孔摸索接種細胞的數(shù)量和加入CCK-8試劑后的培養(yǎng)時間。
  2.有條件的情況下建議采用多通道移液器,可以減少平行孔間的差異。加入CCK-8試劑時,建議斜貼著培養(yǎng)板壁加,不要插到培養(yǎng)基頁面下加,容易產(chǎn)生氣泡,會干擾OD值讀數(shù)。
  3.白細胞可能需要培養(yǎng)較長時間。
  4.當使用標準96孔板時,貼壁細胞的小接種量至少為1,000個/孔(100μL培養(yǎng)基)。檢測白細胞時的靈敏度相對較低,因此*接種量不低于2,500個/孔(100μL培養(yǎng)基)。如果要使用24孔板或6孔板實驗,請先計算每孔相應的接種量,并按照每孔培養(yǎng)基總體積的10%加入CCK-8溶液。
  5.如果沒有450nm的濾光片,可以使用吸光度在430-490 nm之間的濾光片,但是450nm濾光片的檢測靈敏度。
  6.如果待測物質有氧化性或還原性的話,可在加CCK-8之前更換新鮮培養(yǎng)基,去掉藥物的影響。當然藥物影響比較小的情況可以不更換培養(yǎng)基,直接扣除培養(yǎng)基中加入藥物后的空白吸收即可。

滬公網(wǎng)安備 31011802001678號

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